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      HAKATA10099-141胎牛血清的保存與溶解

      2017-05-17 瀏覽次數:1642

      血清10099-141血清的溶解與保存
      血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被 除去的 血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白 、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。
      1、如果不用,先放置-80℃保存。
      2、如果要用,可于4℃冰箱放置過夜,再在室溫溶解。
      3、溶解好的血清應立即分裝,-80℃保存。
      4、保存于-80℃的血清解凍時應先與4℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。
      細胞傳代方法
      根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:
      1.懸浮生長細胞傳代
      離心法傳代:離心(1000轉/分)去上清,沉淀物加新培養液后再混勻傳代。
      直接傳代法:懸浮細胞沉淀在瓶壁時,將上清培養液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。
      2.半懸浮生長細胞傳代(雜交瘤)
      此類細胞部分呈現貼壁生長現象,但貼壁不牢,可用直接吹
      打法使細胞從瓶壁脫落下來,進行傳代。
      3.貼壁生長細胞傳代
      采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
      細胞冷凍保存
      細胞應生長良好,處于對數生長期,密度為80%左右。
      2.注意冷凍保護劑之品質。DMSO質量要好,應無菌且無色。
      3.冷凍保存之細胞濃度:一般成纖維細胞1~3x106cells/ml,懸浮細胞5~10x106cells/ml,上皮細胞2~5x106。
      4.凍存液的配方是:60%無血清培養液30%血清10%DMSO

      HAKATA10099-141胎牛血清

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